Riassunto: Oncodiagnostica molecolare

📋 Schema del Corso

1. Ruolo dei test molecolari
2. Sequenza adenoma-carcinoma
3. Campioni e tecniche molecolari
4. Alterazioni genomiche e biomarcatori
5. Applicazioni cliniche della NGS
6. Diagnosi del carcinoma polmonare
7. Mutazioni e terapia polmonare
8. Resistenza e immunoterapia

📖 1. Ruolo dei test molecolari

★ Da sapere

📌 I test molecolari oncologici servono soprattutto a identificare i soggetti con tumori ereditari, come nella sindrome di Lynch, e a selezionare il trattamento più efficace in base alle caratteristiche molecolari del tumore.

• Le applicazioni dei test molecolari comprendono: diagnosi del cancro, strumenti ausiliari per la diagnosi del cancro, sottoclassificazione dei tumori

Approfondimenti

• Il monitoraggio della malattia tumorale residua e la rilevazione precoce del tumore sono applicazioni ancora in sviluppo delle tecniche molecolari moderne.

💡 Trucco mnemonico

Ereditarietà: identificare il rischio; terapia: scegliere il trattamento

📖 2. Sequenza adenoma-carcinoma

★ Da sapere

• La sequenza adenoma-carcinoma descrive la trasformazione biomolecolare e morfologica da polipo benigno a carcinoma maligno.

• La trasformazione da adenoma a carcinoma richiede un periodo variabile fra 3 e 6 anni, quindi la malattia è iniziata anni prima della diagnosi.

Approfondimenti

• La poliposi familiare con polipi multipli è tipica della sindrome di Peutz-Jeghers.

💡 Trucco mnemonico

Polipo benigno → adenoma → carcinoma maligno

📖 3. Campioni e tecniche molecolari

★ Da sapere

• Le principali fonti di cellule nucleate sono:
  • sangue periferico
  • campione di tumore
  • fluidi corporei
  • radice dei capelli
  • liquido seminale
  • villi coriali
  • liquido amniotico
  • tampone buccale

Approfondimenti

• Le tecniche utilizzate in precedenza comprendono:
  • blotting
  • ibridazione
  • PCR
  • RT-PCR
  • sequenziamento del DNA
  • clonazione del cDNA
  • proteina ricombinante

📖 4. Alterazioni genomiche e biomarcatori

🔑 Concetti chiave e definizioni

• Her2/neu: un proto-oncogene localizzato sul braccio lungo del cromosoma 17q che codifica per un fattore di crescita transmembrana tirosin-chinasico

★ Da sapere

• L’amplificazione o la sovraespressione di Her2/neu è presente nel 10-34% dei tumori della mammella ed è associata a risultati sfavorevoli.

📌 L’esame istologico di Her2 assegna i punteggi 0, 1, 2 o 3, mentre la FISH quantifica l’amplificazione del gene Her2 quando il risultato istologico è dubbio.

Approfondimenti

• Il danno a carico del DNA è definito mutazione genomica, quello a carico dell’RNA alterazione trascrittomica, quello a carico delle proteine alterazione proteomica e quello a carico del metabolismo alterazione metabolomica.

💡 Trucco mnemonico

Mutazione → alterazione molecolare → diagnosi e terapia mirata

📖 5. Applicazioni cliniche della NGS

🔑 Concetti chiave e definizioni

• Leucemia mieloide cronica: una neoplasia ematologica caratterizzata dalla traslocazione dei tratti genetici ABL e BCR e dall’accumulo progressivo di forme mieloidi immature
• Next Generation Sequencing: una tecnica ad alta velocità e produttività che genera milioni di sequenze contemporaneamente e consente di sequenziare, risequenziare e confrontare dati genomici

📝 Punti essenziali

• Imatinib, o Gleevec, si inserisce nella tasca dell’ATP della tirosin-chinasi BCR-ABL, la rende inattiva e blocca la stimolazione proliferativa dei globuli bianchi.

📌 Una mutazione driver sostiene la crescita tumorale e il suo blocco può uccidere il tumore, mentre una mutazione non driver non viene efficacemente colpita dalla terapia.

💡 Trucco mnemonico

NGS: nuove mutazioni, geni ereditari, terapia personalizzata, ctDNA

📖 6. Diagnosi del carcinoma polmonare

★ Da sapere

📌 La NGS consente di testare contemporaneamente più geni nei tumori ereditari, superando i limiti dei test tradizionali, che sono più lenti, costosi e a bassa produttività.

• Il DNA tumorale circolante è un biomarcatore per la valutazione non invasiva del carico tumorale e gli approcci basati su NGS ne aumentano la sensibilità di rilevazione.

Approfondimenti

• La NGS ha identificato nuove mutazioni in:
  • cancro della vescica
  • carcinoma a cellule renali
  • cancro del polmone a piccole cellule
  • cancro della prostata
  • leucemia mieloide acuta
  • leucemia linfocitica cronica

💡 Trucco mnemonico

Radiografia → TAC → PET → biopsia → analisi molecolare

📖 7. Mutazioni e terapia polmonare

★ Da sapere

• 🔄 L’iter diagnostico comprende:

  1. radiografia del torace
  2. TAC
  3. PET
  4. risonanza magnetica cerebrale
  5. broncoscopia o biopsia TAC-guidata

• Le principali forme istologiche sono:

  • carcinoma a piccole cellule
  • adenocarcinoma
  • carcinoma squamoso
  • carcinoma a grandi cellule

Approfondimenti

• Il carcinoma a piccole cellule origina da cellule neuroendocrine dell’epitelio bronchiale, l’adenocarcinoma dal tessuto epiteliale delle mucose polmonari, il carcinoma a grandi cellule interessa generalmente la pleura e il carcinoma squamoso origina generalmente nei bronchi.

💡 Trucco mnemonico

Oncogeni stimolano la proliferazione, oncosoppressori la frenano

📖 8. Resistenza e immunoterapia

📝 Punti essenziali

📌 Il cancro può derivare da mutazioni di oncogeni, che stimolano la proliferazione cellulare, oppure di geni oncosoppressori, la cui mutazione elimina il controllo negativo della proliferazione.

• Le linee guida per l’adenocarcinoma polmonare raccomandano la ricerca di mutazioni di EGFR, traslocazioni di ALK e ROS-1 e valutazione dei livelli di PD-L1.

• 🔄 Osimertinib agisce secondo questa sequenza: blocca il sito di legame dell’ATP di EGFR, impedisce la trasduzione del segnale attraverso AKT e MEK1/2, riduce la proliferazione cellulare, favorisce la regressione del tumore

• La mutazione T790M può comparire dopo 5 anni, impedire a osimertinib di legarsi alla tasca dell’ATP e determinare la ricrescita del tumore.

• PD-L1 espresso dalle cellule tumorali si lega a PD-1 delle cellule immunitarie, nasconde il tumore al sistema immunitario, mentre gli anticorpi monoclonali riattivano le cellule immunitarie che uccidono la cellula tumorale tramite perforine.

💡 Trucco mnemonico

T790M → perdita del legame con ATP → ricrescita tumorale; blocco PD-L1/PD-1 → riattivazione immunitaria

📊 Tabelle di sintesi

Tecniche e alterazioni rilevate